一種基于納米孔測序儀的分枝桿菌快速鑒定方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202110836894.8 申請日 -
公開(公告)號 CN113667728A 公開(公告)日 2021-11-19
申請公布號 CN113667728A 申請公布日 2021-11-19
分類號 C12Q1/6869(2018.01)I;C12Q1/689(2018.01)I;C12Q1/04(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I;C12R1/32(2006.01)N 分類 生物化學;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學;酶學;突變或遺傳工程;
發(fā)明人 谷紅倉;陶春豪;許佩松;王云飛;車仙榮 申請(專利權(quán))人 杭州圣庭醫(yī)療科技有限公司
代理機構(gòu) 杭州華鼎知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 代理人 魏亮
地址 311113浙江省杭州市余杭區(qū)良渚街道通運街362號11幢301室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種基于納米孔測序儀的分枝桿菌快速鑒定方法,屬于分子生物學領(lǐng)域,本發(fā)明包括如下步驟:步驟一,設(shè)計結(jié)核分枝桿菌插入序列IS6110、hsp65、rpoB、16S rRNA、gyrB基因待測區(qū)域的特異性引物;步驟二,得到含有特定堿基序列的引物并混合形成引物池;步驟三,合成Barcode引物;步驟四,提取基因組DNA;步驟五,第一輪擴增并純化;步驟六,第二輪擴增并純化;步驟七,構(gòu)建測序文庫并純化;步驟八,使用納米測序儀測序,對數(shù)據(jù)進行質(zhì)控分析后,進行數(shù)據(jù)分析;本發(fā)明通過找到這5種靶基因組合的擴增引物,使擴增序列能對分枝桿菌不同菌種進行鑒定區(qū)分,實現(xiàn)快速、準確、靈敏的鑒定分歧桿菌。