一種基于納米孔測(cè)序儀的結(jié)核分枝桿菌耐藥型鑒定方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202110836869.X 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)(公告)號(hào) CN113493848A 公開(kāi)(公告)日 2021-10-12
申請(qǐng)公布號(hào) CN113493848A 申請(qǐng)公布日 2021-10-12
分類號(hào) C12Q1/689(2018.01)I;C12Q1/6858(2018.01)I;C12Q1/04(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 谷紅倉(cāng);陶春豪;許佩松;王云飛;車仙榮 申請(qǐng)(專利權(quán))人 杭州圣庭醫(yī)療科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 杭州華鼎知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 代理人 魏亮
地址 311113浙江省杭州市余杭區(qū)良渚街道通運(yùn)街362號(hào)11幢301室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種基于納米孔測(cè)序儀的結(jié)核分枝桿菌耐藥型鑒定方法,包括如下步驟:步驟一,結(jié)核分枝桿菌插耐藥相關(guān)基因rpoB、katG、?15 inhA、pncA、embB、rpsL、gyrA、gyrB的特異性引物;步驟二,得到8對(duì)含有特定堿基序列的引物,再混合形成引物池;步驟三,合成barcode引物;步驟四,提取基因組DNA;步驟五,第一輪擴(kuò)增并純化;步驟六,第二輪擴(kuò)增;步驟七,構(gòu)建測(cè)序文庫(kù)并純化;步驟八,使用納米測(cè)序儀測(cè)序,對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行質(zhì)控分析后,進(jìn)行數(shù)據(jù)分析;屬于分子生物學(xué)領(lǐng)域,采用本發(fā)明的方法能夠得知6種臨床常見(jiàn)抗結(jié)核藥物的耐藥突變情況,檢測(cè)快速、準(zhǔn)確、全面。