一種用于PacBio測序的文庫構(gòu)建方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202110042549.7 申請日 -
公開(公告)號 CN113136416B 公開(公告)日 2022-05-17
申請公布號 CN113136416B 申請公布日 2022-05-17
分類號 C12Q1/6806(2018.01)I;C12N15/10(2006.01)I;C40B50/06(2006.01)I 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 張勇;賈行星;譚生軍;蔡英傲;張雅瓊 申請(專利權(quán))人 中國科學(xué)院動(dòng)物研究所
代理機(jī)構(gòu) 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 -
地址 100101北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院5號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種用于PacBio測序的文庫構(gòu)建方法。本發(fā)明提供了一種PacBio測序文庫構(gòu)建方法,為將含有發(fā)卡結(jié)構(gòu)的測序接頭通過轉(zhuǎn)座酶插入目標(biāo)DNA分子,實(shí)現(xiàn)DNA環(huán)化,得到PacBio測序文庫。本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)證明,本發(fā)明的PacBio測序文庫構(gòu)建方法,通過有效選擇反應(yīng)緩沖液,使整個(gè)反應(yīng)在從轉(zhuǎn)座插入片段化到文庫環(huán)化完成均在同一反應(yīng)管中完成,尤其在低DNA用量的測序文庫構(gòu)建過程中有效地避免了常規(guī)片段化步驟后的純化回收導(dǎo)致的DNA樣品損失,提高了模板的利用率,減少了實(shí)驗(yàn)的復(fù)雜性和時(shí)間消耗,可以實(shí)現(xiàn)最快在2小時(shí)內(nèi)完成PacBio測序文庫的構(gòu)建與回收。