能檢測多種禽呼吸道病原的多重連接探針擴(kuò)增鑒別試劑盒

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201910109233.8 申請(qǐng)日 -
公開(公告)號(hào) CN109706269B 公開(公告)日 2022-07-01
申請(qǐng)公布號(hào) CN109706269B 申請(qǐng)公布日 2022-07-01
分類號(hào) C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/686(2018.01)I;C12R1/93(2006.01)N 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 周瑩珊;邵春艷;宋厚輝;王曉杜;陳琳;姜?jiǎng)?宋泉江;周彬;楊楊;楊永春;孫靜;程昌勇 申請(qǐng)(專利權(quán))人 浙江農(nóng)林大學(xué)
代理機(jī)構(gòu) 杭州中成專利事務(wù)所有限公司 代理人 -
地址 311304浙江省杭州市臨安區(qū)錦城鎮(zhèn)環(huán)城北路88號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及檢驗(yàn)檢疫領(lǐng)域,旨在提供一種能檢測多種禽呼吸道病原的多重連接探針擴(kuò)增鑒別試劑盒。該試劑盒中包括:預(yù)擴(kuò)增引物混合液,含有序列如SEQ ID NO:1~14所示預(yù)擴(kuò)增引物;探針混合液,含有序列如SEQ ID NO:15~28所示的左側(cè)探針和右側(cè)探針;MLPA緩沖液;連接緩沖液A;連接緩沖液B;連接酶Ligase?65;PCR反應(yīng)混合液,含有序列SEQ ID NO:29和30所示的通用引物;SALSA聚合酶;陰性對(duì)照;陽性對(duì)照。本發(fā)明所述試劑盒具有高通量特點(diǎn),能同時(shí)檢測7種病原,利用全自動(dòng)核酸分析儀,每次可同時(shí)檢測96個(gè)樣品,為病原體的鑒別診斷和應(yīng)急診斷提供高通量檢測技術(shù)。另外,還具備特異性好和靈敏度高的優(yōu)點(diǎn),通過增加RT?PCR步驟對(duì)目標(biāo)基因進(jìn)行富集,最低可檢出1拷貝的目標(biāo)基因。