一種定點刪除轉(zhuǎn)基因細胞中的外源基因的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN200810246596.8 申請日 -
公開(公告)號 CN101760473B 公開(公告)日 2013-04-17
申請公布號 CN101760473B 申請公布日 2013-04-17
分類號 C12N15/85(2006.01)I;G01N15/10(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/02(2006.01)I 分類 生物化學;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學;酶學;突變或遺傳工程;
發(fā)明人 王少華;丁方榮;孫秀柱;戴蘊平;李寧 申請(專利權(quán))人 北京濟普霖生物技術(shù)有限公司
代理機構(gòu) 北京路浩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 北京濟福霖生物技術(shù)有限公司
地址 100085 北京市海淀區(qū)知春路51號5676室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種定點刪除轉(zhuǎn)基因細胞中外源基因的方法,其通過構(gòu)建表達熒光蛋白和cre重組酶的表達載體,將該表達載體導入目的細胞中,從而在目的細胞中cre重組酶與熒光蛋白共表達,cre酶定點刪除掉LoxP-Nn-LoxP結(jié)構(gòu)中的NnDNA序列,通過檢測細胞中熒光蛋白的表達,即達到分選基因被定點刪除的細胞。本發(fā)明方法能夠?qū)ν庠椿蚧驑擞浕蜻M行準確的刪除,并能準確分選出基因被定點刪除的細胞,避免了使用藥物分選,對培育無標記基因的轉(zhuǎn)基因動物,對轉(zhuǎn)基因動物研究的進一步發(fā)展及轉(zhuǎn)基因動物食品安全具有重大的意義。