一種宏基因組樣本去宿主化提取試劑盒的使用方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202010059725.3 申請日 -
公開（公告）號 CN111088249A 公開（公告）日 2020-05-01
申請公布號 CN111088249A 申請公布日 2020-05-01
分類號 C12N15/10 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 劉淑君;王春香 申請（專利權）人 泰州健為醫(yī)學檢驗實驗有限公司
代理機構(gòu) 南京常青藤知識產(chǎn)權代理有限公司 代理人 黃胡生
地址 225300 江蘇省泰州市中國醫(yī)藥城口泰路西側(cè)、陸家路東側(cè)G52幢59號四層西側(cè)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供一種宏基因組樣本去宿主化提取試劑盒的使用方法，涉及生物檢測領域，包括以下步驟：病原體富集：在1.5mL第一離心管中加入樣本，于室溫條件下離心5?10min，除去上清液；宿主細胞裂解：在第一離心管中加入200?1000μL裂解緩沖液Buffer G1，20?40℃孵育10?30min；宿主DNA去除：第一離心管于室溫條件下離心2?5min，除去上清液，向第一離心管中再次加入200?500μL裂解緩沖液Buffer G1和1?3μL全能核酸酶，30?40℃孵育10?30min，離心除去上清液，加入500?1000μL Buffer G1清洗沉淀兩次；微生物菌體破壁：加入100?300μL溶菌酶重懸沉淀后將重懸液轉(zhuǎn)移到裝有玻璃珠的裂解管中，將裂解管置于30?40℃孵育10?30min，渦旋混勻處理5?10min；微生物裂解和核酸提取。本發(fā)明應用范圍廣，兼容性好，提取效果好、效率高，成本低。