一種G蛋白偶聯(lián)受體對化合物特異性的檢測方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201210301051.9 申請日 -
公開(公告)號 CN102839193A 公開(公告)日 2012-12-26
申請公布號 CN102839193A 申請公布日 2012-12-26
分類號 C12N15/85(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I;C12Q1/02(2006.01)I 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 任輝;黃斌;辛?xí)匝?韓藍(lán)青;張曙光 申請(專利權(quán))人 海貍(廣州)生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 廣州市華學(xué)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 海貍(廣州)生物科技有限公司
地址 510663 廣東省廣州市廣州科學(xué)城掬泉路3號國際企業(yè)孵化器D313
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種G蛋白偶聯(lián)受體對化合物特異性的檢測方法,該方法包括以下步驟:制備重組HEK-293細(xì)胞懸液;在細(xì)胞懸液中加入腔腸素,得到重組細(xì)胞液;將重組細(xì)胞液分為對照組和待測組,在待測組中加入待測化合物溶液,在對照組中加入Hank's平衡鹽溶液;若待測組發(fā)出的熒光信號強(qiáng)度高于對照組,具有顯著差異,則說明該待測化合物對重組的HEK-293細(xì)胞中的GPCR有激活作用,反之則無;繼續(xù)在待測組中加入GPCR相應(yīng)的激動劑,檢測其熒光信號;若檢測到的熒光信號強(qiáng)度顯著低于對照組,則說明該待測化合物對重組的HEK-293細(xì)胞中的GPCR有抑制作用,反之則無。本發(fā)明所提供的方法是一種靈活可變的檢測模式,不但可以通過已知GPCR來檢測未知化合物,而且可以通過已知化合物來反向檢測與其特異性結(jié)合的GPCR。