一種烤煙蚜傳病毒多重復(fù)合PCR的檢測(cè)方法
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN202111193779.X | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開（公告）號(hào) | CN114703318A | 公開（公告）日 | 2022-07-05 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN114703318A | 申請(qǐng)公布日 | 2022-07-05 |
| 分類號(hào) | C12Q1/70（2006.01）I;C12Q1/686（2018.01）I;C12N15/11（2006.01）I;C12R1/94（2006.01）N | 分類 | 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程; |
| 發(fā)明人 | 祖慶學(xué);李昊熙;聶忠揚(yáng);李宏江;林松;張翼飛;周建云 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 | 貴州省煙草公司貴陽市公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 長(zhǎng)沙和雅知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） | 代理人 | - |
| 地址 | 550000貴州省貴陽市南明區(qū)中華南路45號(hào)華坤發(fā)展大廈23層23-4號(hào) | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明屬于植物病毒學(xué)檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種烤煙蚜傳病毒多重復(fù)合PCR的檢測(cè)方法，包括以下幾個(gè)步驟：（1）設(shè)計(jì)用于擴(kuò)增黃瓜花葉病毒（CMV）、馬鈴薯Y病毒（PVY）2種病毒基因片段的特異性引物；（2）提取樣本總RNA；（3）含病毒RNA的煙草植物總RNA樣品高溫變性作為模板進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)合成cDNA第一鏈；（4）利用單管多重PCR擴(kuò)增反應(yīng)得到PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；（5）將獲得的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)。本檢測(cè)體系通過一次PCR反應(yīng)，就可以鑒定出復(fù)合侵染的多種病毒，適合基層檢測(cè)站點(diǎn)快速和高效地鑒定大批量煙葉樣品，為后續(xù)的被侵染煙株的提早發(fā)現(xiàn)和抗病毒遺傳育種等病毒防控工作打下了基礎(chǔ)。 |
