用于快速篩選和鑒定有效shRNA的載體及其篩選和鑒定方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN200910044738.7 申請(qǐng)日 -
公開(公告)號(hào) CN102051371B 公開(公告)日 2013-11-20
申請(qǐng)公布號(hào) CN102051371B 申請(qǐng)公布日 2013-11-20
分類號(hào) C12N15/79(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/02(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 易銀沙;呂媛;孫永林;袁炳秋 申請(qǐng)(專利權(quán))人 湖南能潤(rùn)醫(yī)學(xué)診斷技術(shù)股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 長(zhǎng)沙正奇專利事務(wù)所有限責(zé)任公司 代理人 湖南能潤(rùn)醫(yī)學(xué)診斷技術(shù)股份有限公司
地址 410013 湖南省長(zhǎng)沙市高新區(qū)火炬城M3組團(tuán)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種快速篩選和鑒定有效shRNA真核表達(dá)載體,將如下結(jié)構(gòu)構(gòu)建至同一個(gè)真核表達(dá)載體上:1)由polIII型啟動(dòng)子調(diào)控的shRNA表達(dá)框結(jié)構(gòu),即polIII型啟動(dòng)子+shRNA插入位點(diǎn);2)由CMV啟動(dòng)子調(diào)控的熒光蛋白表達(dá)框,并在熒光蛋白基因后面緊跟一個(gè)多克隆位點(diǎn)(MCS);3)由SV40啟動(dòng)子調(diào)控的熒光蛋白表達(dá)框,該熒光蛋白的熒光顏色與第2)中的熒光蛋白的熒光顏色不同。本發(fā)明還提供了用上述載體篩選或驗(yàn)證有效shRNA的方案,利用此載體和方法篩選和鑒定有效shRNA,不需做RT-PCR或Western-blot檢測(cè),快速、簡(jiǎn)單、方便、成本低廉,特別適合于從多個(gè)預(yù)先設(shè)計(jì)的備選shRNA中篩選有效shRNA。