腫瘤細(xì)胞中靶向性表達(dá)shRNA的真核表達(dá)載體

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN200910044221.8 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN101993892A 公開（公告）日 2011-03-30
申請(qǐng)公布號(hào) CN101993892A 申請(qǐng)公布日 2011-03-30
分類號(hào) C12N15/85(2006.01)I;A61K48/00(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I;C12N7/01(2006.01)I;C12R1/93(2006.01)N 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 易銀沙;呂媛;孫永林;袁炳秋 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 湖南能潤(rùn)醫(yī)學(xué)診斷技術(shù)股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 長(zhǎng)沙正奇專利事務(wù)所有限責(zé)任公司 代理人 長(zhǎng)沙贏潤(rùn)生物技術(shù)有限公司;易銀沙;呂媛;孫永林;袁炳秋;湖南能潤(rùn)醫(yī)學(xué)診斷技術(shù)股份有限公司
地址 410000 湖南省長(zhǎng)沙市岳麓區(qū)銀盆南路315號(hào)火炬城M3組團(tuán)1棟3樓
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種腫瘤細(xì)胞中靶向性表達(dá)shRNA的真核表達(dá)載體，包括如下結(jié)構(gòu)：1)由polII型啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的、將熒光蛋白基因與mirshRNA結(jié)構(gòu)串聯(lián)在一起的表達(dá)框結(jié)構(gòu)；2)經(jīng)過CMV增強(qiáng)子和SV40增強(qiáng)子增強(qiáng)的hTERT啟動(dòng)子；3)以mir30為基礎(chǔ)的mirshRNA結(jié)構(gòu)：mir30左臂-shRNA-mir30右臂，此mirshRNA結(jié)構(gòu)可多個(gè)串聯(lián)；4)Kan或者Amp抗性篩選標(biāo)記；5)LR同源重組臂。利用本發(fā)明提供的方法構(gòu)建上述shRNA真核表達(dá)載體，能夠在腫瘤細(xì)胞中靶向性、特異性地表達(dá)單條或多條shRNA，在對(duì)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行RNA干擾、實(shí)行基因治療的同時(shí)，又不影響正常細(xì)胞，解決了利用RNA干擾進(jìn)行基因治療時(shí)的非特異性干擾難題，有助于RNA干擾在腫瘤的基因治療方面的研究和應(yīng)用。