一種直接測(cè)定生物樣品中未經(jīng)分離的小核酸的方法及檢測(cè)試劑盒

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201310754613.X 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN104109708B 公開(kāi)（公告）日 2015-05-13
申請(qǐng)公布號(hào) CN104109708B 申請(qǐng)公布日 2015-05-13
分類號(hào) C12Q1/68(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 梁東;崔坤元;陳波 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 廈門成樸希晟股權(quán)投資合伙企業(yè)（有限合伙）
代理機(jī)構(gòu) - 代理人 -
地址 361000 福建省廈門市海滄區(qū)東孚翁角西路2036號(hào)4層
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種直接測(cè)定生物樣品中未經(jīng)分離的小核酸的方法，包括如下步驟：（1）取生物樣品；（2）加Ploy?A到小核酸的3’端：3）逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)：加入帶一第一引物的寡聚dT及逆轉(zhuǎn)錄酶，生成帶寡聚T+和設(shè)計(jì)的第一引物尾的單鏈cDNA；（4）PCR放大定量小核酸：加入和小核酸序列完全互補(bǔ)或部分互補(bǔ)的第二引物，以及和第一引物完全互補(bǔ)或部分互補(bǔ)的第三引物，之后進(jìn)行PCR檢測(cè)定量小核酸的量。本發(fā)明無(wú)需分離生物樣品中的小核酸，而是直接利用生物樣品測(cè)定其小核酸（如siRNA、miRNA、反義核酸、aptamer)含量。