胰蛋白酶親和層析純化人重組SPINK6蛋白的方法
基本信息
申請?zhí)?/td> | CN201110369066.4 | 申請日 | - |
公開(公告)號 | CN103122028B | 公開(公告)日 | 2016-03-30 |
申請公布號 | CN103122028B | 申請公布日 | 2016-03-30 |
分類號 | C07K14/81(2006.01)I;C07K1/22(2006.01)I | 分類 | 有機化學〔2〕; |
發(fā)明人 | 黃晉江;趙曉蔚;陸海榮;黃青山 | 申請(專利權)人 | 上海高科聯(lián)合生物技術研發(fā)有限公司 |
代理機構 | 上海元一成知識產權代理事務所(普通合伙) | 代理人 | 復旦大學;上海高科聯(lián)合生物技術研發(fā)有限公司 |
地址 | 200433 上海市楊浦區(qū)邯鄲路220號 | ||
法律狀態(tài) | - |
摘要
摘要 | 本發(fā)明公開了一種人重組SPINK6蛋白的親和層析純化方法,其包括:將胰蛋白酶與親和層析介質混合,偶聯(lián)反應,制得胰蛋白酶親和層析介質;將人重組SPINK6蛋白通過預先用緩沖液A平衡好的裝有所述的胰蛋白酶親和層析介質的層析柱;然后用緩沖液A清洗上樣后的胰蛋白酶親和層析柱;再用緩沖液B將SPINK6蛋白從層析柱上洗脫,并收集洗脫峰。本發(fā)明方法獲得的人重組SPINK6蛋白的活性回收率為45-60%,純度可達90%-95%,蛋白純化倍數為10-20倍以上。本方法處理速度快、重復性好、柱效長且結合效率基本不變。 |
