胰蛋白酶親和層析純化人重組SPINK6蛋白的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201110369066.4 申請日 -
公開(公告)號 CN103122028B 公開(公告)日 2016-03-30
申請公布號 CN103122028B 申請公布日 2016-03-30
分類號 C07K14/81(2006.01)I;C07K1/22(2006.01)I 分類 有機化學〔2〕;
發(fā)明人 黃晉江;趙曉蔚;陸海榮;黃青山 申請(專利權)人 上海高科聯(lián)合生物技術研發(fā)有限公司
代理機構 上海元一成知識產權代理事務所(普通合伙) 代理人 復旦大學;上海高科聯(lián)合生物技術研發(fā)有限公司
地址 200433 上海市楊浦區(qū)邯鄲路220號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種人重組SPINK6蛋白的親和層析純化方法,其包括:將胰蛋白酶與親和層析介質混合,偶聯(lián)反應,制得胰蛋白酶親和層析介質;將人重組SPINK6蛋白通過預先用緩沖液A平衡好的裝有所述的胰蛋白酶親和層析介質的層析柱;然后用緩沖液A清洗上樣后的胰蛋白酶親和層析柱;再用緩沖液B將SPINK6蛋白從層析柱上洗脫,并收集洗脫峰。本發(fā)明方法獲得的人重組SPINK6蛋白的活性回收率為45-60%,純度可達90%-95%,蛋白純化倍數為10-20倍以上。本方法處理速度快、重復性好、柱效長且結合效率基本不變。