重組KLK14蛋白的純化方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201110369133.2 申請日 -
公開（公告）號 CN103122346B 公開（公告）日 2016-01-13
申請公布號 CN103122346B 申請公布日 2016-01-13
分類號 C12N9/64(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 黃晉江;葛葵葵;李國棟;黃青山 申請（專利權(quán)）人 上海高科聯(lián)合生物技術(shù)研發(fā)有限公司
代理機構(gòu) 上海元一成知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 復(fù)旦大學(xué);上海高科聯(lián)合生物技術(shù)研發(fā)有限公司
地址 200433 上海市楊浦區(qū)邯鄲路220號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種重組KLK14蛋白的親和層析純化方法，包括步驟：(1)將重組SPINK6蛋白與親和層析介質(zhì)混合，偶聯(lián)反應(yīng)，制得重組SPINK6蛋白親和層析介質(zhì)；(2)將重組KLK14蛋白通過預(yù)先用緩沖液A平衡好的裝有步驟(1)的SPINK6蛋白親和層析介質(zhì)的層析柱；然后用緩沖液A清洗上樣后的重組SPINK6蛋白親和層析柱；再用緩沖液B將重組KLK14蛋白從層析柱上洗脫，并收集洗脫峰。本發(fā)明方法獲得的重組KLK14蛋白的活性回收率為50-65％，純度可達85％-90％，蛋白純化倍數(shù)為10-20倍以上。本發(fā)明方法處理速度快、重復(fù)性好、柱效長且結(jié)合效率基本不變。