KLK14蛋白親和層析純化人重組SPINK6蛋白的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201110369655.2 申請日 -
公開(公告)號 CN103122029B 公開(公告)日 2015-10-28
申請公布號 CN103122029B 申請公布日 2015-10-28
分類號 C07K14/81(2006.01)I;C07K1/22(2006.01)I 分類 有機(jī)化學(xué)〔2〕;
發(fā)明人 陸海榮;黃晉江;李斌賓;黃青山 申請(專利權(quán))人 上海高科聯(lián)合生物技術(shù)研發(fā)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 上海元一成知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 代理人 復(fù)旦大學(xué);上海高科聯(lián)合生物技術(shù)研發(fā)有限公司
地址 200433 上海市楊浦區(qū)邯鄲路220號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種人重組SPINK6蛋白的親和層析純化方法,包括:將人重組KLK14蛋白與親和層析介質(zhì)混合,偶聯(lián)反應(yīng),制得人重組KLK14蛋白親和層析介質(zhì);將人重組SPINK6蛋白通過預(yù)先用緩沖液A平衡好的裝有上述的胰蛋白酶親和層析介質(zhì)的層析柱;然后用緩沖液A清洗上樣后的人重組KLK14蛋白親和層析柱;再用緩沖液B將SPINK6蛋白從層析柱上洗脫,并收集洗脫峰。采用本發(fā)明的方法,人重組SPINK6蛋白的活性回收率為45-60%,純度可達(dá)90%-95%,蛋白純化倍數(shù)為10-20倍以上。本發(fā)明方法處理速度快、重復(fù)性好、柱效長且結(jié)合效率基本不變。