KLK14蛋白親和層析純化人重組SPINK6蛋白的方法
基本信息
申請?zhí)?/td> | CN201110369655.2 | 申請日 | - |
公開(公告)號 | CN103122029B | 公開(公告)日 | 2015-10-28 |
申請公布號 | CN103122029B | 申請公布日 | 2015-10-28 |
分類號 | C07K14/81(2006.01)I;C07K1/22(2006.01)I | 分類 | 有機(jī)化學(xué)〔2〕; |
發(fā)明人 | 陸海榮;黃晉江;李斌賓;黃青山 | 申請(專利權(quán))人 | 上海高科聯(lián)合生物技術(shù)研發(fā)有限公司 |
代理機(jī)構(gòu) | 上海元一成知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) | 代理人 | 復(fù)旦大學(xué);上海高科聯(lián)合生物技術(shù)研發(fā)有限公司 |
地址 | 200433 上海市楊浦區(qū)邯鄲路220號 | ||
法律狀態(tài) | - |
摘要
摘要 | 本發(fā)明公開了一種人重組SPINK6蛋白的親和層析純化方法,包括:將人重組KLK14蛋白與親和層析介質(zhì)混合,偶聯(lián)反應(yīng),制得人重組KLK14蛋白親和層析介質(zhì);將人重組SPINK6蛋白通過預(yù)先用緩沖液A平衡好的裝有上述的胰蛋白酶親和層析介質(zhì)的層析柱;然后用緩沖液A清洗上樣后的人重組KLK14蛋白親和層析柱;再用緩沖液B將SPINK6蛋白從層析柱上洗脫,并收集洗脫峰。采用本發(fā)明的方法,人重組SPINK6蛋白的活性回收率為45-60%,純度可達(dá)90%-95%,蛋白純化倍數(shù)為10-20倍以上。本發(fā)明方法處理速度快、重復(fù)性好、柱效長且結(jié)合效率基本不變。 |
